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固定化酶求助 已有1人參與
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我目前在做固定化酶,用的粗酶液。材料是硅烷化之后再用戊二醛修飾,最后再和酶液反應(yīng)固定化,前兩批次的反應(yīng)效果都挺好,轉(zhuǎn)化率能到百分之60,但是重復(fù)了兩次實(shí)驗(yàn)都是前兩次反應(yīng)沒問題,到第三批就沒有轉(zhuǎn)化率了。 之后我用考馬斯亮藍(lán)定性了固定化酶后的材料和反應(yīng)液,發(fā)現(xiàn)第6批次的固定化后的材料和考馬斯亮藍(lán)顯藍(lán)色,對(duì)照沒有固定化酶的載體不能使考馬斯亮藍(lán)變藍(lán),所以確定固定化酶蛋白沒有斷下來,可能蛋白變性,但是為什么是第3批變性呢,有經(jīng)驗(yàn)的戰(zhàn)友給點(diǎn)幫助和建議吧,有同樣的情況嗎?我的酶最是溫度50度,每批次反應(yīng)24小時(shí),非常感謝! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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