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bayu18新蟲 (正式寫手)
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[求助]
hiTail-PCR引物設(shè)計(jì)
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最近要做hiTail-PCR,也是第一次做,現(xiàn)在在設(shè)計(jì)引物,簡(jiǎn)并引物是已知的,但在特異性引物設(shè)計(jì)上遇到一點(diǎn)問題: 1、三條特異性引物的長(zhǎng)度上有什么要求? 2、我看參考文獻(xiàn)上(liu and chen ,2007)說特異性引物的退火溫度在65-68度,但我在有些論壇上看說要68度以上,還有的說是65度左右,到底特異性引物的退火溫度的標(biāo)準(zhǔn)是多少? 3、有的論壇說做第一輪PCR的時(shí)候可以把簡(jiǎn)并引物混一塊做,可以么? 4、hiTail-PCR的程序完全按照參考文獻(xiàn)(liu and chen ,2007)上的做?有沒有需要改動(dòng)的? 非常感謝各位大俠相助。。。 |
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1、引物長(zhǎng)度依據(jù)其退火溫度設(shè)計(jì) 2、退火溫度68度 3、可以混合 4、文章上的程序就可以用,不用改 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

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