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kangaroo0513新蟲 (正式寫手)
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BiFC或者splitGFP的融合蛋白linker怎么選擇？ 已有2人參與
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話說，看了別人的文獻(xiàn)，再使用splitGFP或者BiFC的時(shí)候，也沒有太具體說怎么設(shè)計(jì)linker。。有沒有有經(jīng)驗(yàn)的大蝦，指點(diǎn)一下，我的目的基因和半個(gè)熒光團(tuán)之間的linker怎么設(shè)計(jì)比較好？另外，熒光團(tuán)應(yīng)該放在N端還是C端（有莫有影響）？ 倒是看見一篇文獻(xiàn)，用的splitGFP，把GFP掰成了3份，其中1份彌散表達(dá)，2份做融合蛋白，此時(shí)他用的linker是30aa的柔性linker。因此有以上問題。額外的，是不是長一些的柔性linker連接就不必糾結(jié)連在N端還是C端？但是長一些的linker會(huì)不會(huì)造成本來相距較遠(yuǎn)的兩個(gè)分子出現(xiàn)假陽性？ 我的目的蛋白一個(gè)1300bp（52kd）一個(gè)500bp（19kd）左右。。。哪位神仙狂指點(diǎn)me吧。。 |
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