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yh65770鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
求大神幫忙看下，我養(yǎng)的人羊膜間充質(zhì)干細胞，養(yǎng)了幾天形態(tài)就發(fā)生變化？！ 已有5人參與
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實驗需要養(yǎng)了2大瓶（225cm培養(yǎng)瓶）羊膜間充質(zhì)干細胞，是師兄從羊膜組織中提的原代細胞，大概傳了有8、9代的樣子，然后分了我兩瓶，剛開始接手的時候看著形態(tài)還比較像干細胞，細長型的，結(jié)果我養(yǎng)了3、4天后形態(tài)就發(fā)生了變化，呈多邊形不規(guī)則形狀總之不像干細胞了，中間就換了次液什么也沒干，培養(yǎng)基也沒換，看著也沒有明顯的污染跡象，但形態(tài)不知道怎么就改變了，有人說有可能是表型分化了，但文獻上不是說羊膜干細胞可以傳個10多代都沒問題么。。。求大神指點！謝謝了~![\"求大神幫忙看下，我養(yǎng)的人羊膜間充質(zhì)干細胞](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1104/bw134h3808362_1446623947_939.jpg#opennewwindow\") ![\"求大神幫忙看下](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1104/bw134h3808362_1446623956_237.jpg#opennewwindow\") ![\"求大神幫忙看下](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1104/bw134h3808362_1446624180_800.jpg#opennewwindow\") 這是10.30號之前的狀態(tài)，密度還不是很高，但形態(tài)看著還像干細胞，下面是幾天后的圖片 這是11月2.3號照的照片，形態(tài)明顯發(fā)生變化，完全不像干細胞了，到底怎么回事，求各位大神指點一下！~ |
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如果培養(yǎng)基是澄清的就基本排除污染的問題。一個很關(guān)鍵的問題是你現(xiàn)在培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞是第幾代的，如果是你說的已經(jīng)是10代以后了，這就是典型的間充質(zhì)干細胞的老化現(xiàn)象，很正常。我們提取的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，一般只使用3-5代來做實驗，5代以后細胞就會容易出現(xiàn)老化現(xiàn)象，細胞會變大等問題。你需要確定的是羊膜間充質(zhì)干細胞一般實驗中用多少代的。另外原代干細胞對血清要求比較高，你看你使用的血清級別夠不夠？ 看圖片你這細胞就是典型的干細胞老化，正常。 |
5樓2015-11-05 11:23:18
Frank0917
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8樓2015-11-06 15:55:52
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2樓2015-11-04 16:09:30
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| 細胞培養(yǎng)常見問題就是污染，樓主可以看看是不是化學(xué)污染、物理污染（即溫度、放射線）、細菌污染、支原體污染等：如果不是就看看培養(yǎng)基成分對不對，有沒有變質(zhì)，不然就是菌本身的問題 |
3樓2015-11-04 17:03:38
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4樓2015-11-04 18:27:50
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非常感謝 7樓2015-11-06 15:54:38
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9樓2015-11-06 16:25:14
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10樓2015-11-09 20:41:00
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