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WB檢測多抗 已有2人參與
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親們，我合成了一個多抗現(xiàn)在用WB檢測，從真核里面雜不出條帶，要么就是模糊的一片；后來試用了ProteinA拉，一部分染色，一部分用多抗雜，結(jié)果染色的很明顯，條帶也很單一，但是雜的反而沒有，一顯色背景都變成了黃色的。不知道這是不是因為上樣有點多？按理說ProteinA拉的染色結(jié)果不錯的話，應(yīng)該能雜出條帶的。多抗我是按照1:100加的，不知是不是多抗太少了。準備減少下上樣量并做個多抗梯度看看 大家有沒有遇到類似問題的，是怎么解決的呢？請求幫助 |
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2樓2015-11-05 08:37:07
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
846031273: 金幣+5, ★有幫助 2015-11-07 23:21:23
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846031273: 金幣+5, ★有幫助 2015-11-07 23:21:23
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你的材料是什么？可以點個正對照或Marker試試，還有可能是你的抗體加多了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2015-11-05 08:45:34
難道是多抗太多了？我剛剛做了個蛋白上樣量的梯度，依然沒有雜出東西來；但是跟我一起做抗體的同學他做了多抗梯度，也是沒有條帶。您看，這是我今晚剛顯色的結(jié)果，唉……4樓2015-11-07 23:16:43
5樓2015-11-07 23:17:42
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