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[求助]
關(guān)于解旋DNA雙鏈的方法求助 已有2人參與
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小弟剛剛?cè)腴T，想將DNA解旋 我是用的方法是 1mM Na2EDTA和300mM NaOH，調(diào)pH＞13�？傆脮r(shí)間30min 但是怎么試驗(yàn)都感覺(jué)不是很成功。大蝦門都使用什么方法�。咳绻羞@類文獻(xiàn)更好了。合適的話發(fā)我郵箱zhaiflavour@163.com。 希望大家積極發(fā)言啊。拜謝了。 謝謝各位大蝦啦！ |
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5樓2015-11-06 23:50:27
邪惡的大肉丸
金蟲(chóng) (著名寫手)
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- 專業(yè): 環(huán)境分析化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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不做這個(gè)方向，不甚了解。解旋應(yīng)該是成熟操作，如果上述方法是文獻(xiàn)報(bào)道，應(yīng)該就沒(méi)什么問(wèn)題。只是：1 你是根據(jù)什么判斷問(wèn)題出在DNA解旋和再雜化這一環(huán)節(jié)呢？ 2 你的單鏈DNA是通過(guò)什么方法固定在電極表面的？處理DNA解旋時(shí)用的溶液環(huán)境，是否會(huì)破壞電極連接。（判斷這個(gè)也挺簡(jiǎn)單，有沒(méi)有相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，首先DNA連接到電極表面，再用堿處理，最后檢測(cè)targetDNA，看是否還有信號(hào)） |
7樓2015-11-07 13:05:02
8樓2015-11-07 19:20:41
【答案】應(yīng)助回帖
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那就甲酰胺溶液或者尿素溶液就可以，簡(jiǎn)單暴力，破壞氫鍵雙鏈就打開(kāi)了。還有就是sds溶液也可以，sds里面還可以加氫氧化鈉。 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
11樓2015-11-08 08:50:54
2樓2015-11-06 21:32:20
3樓2015-11-06 22:18:18
biostar2009
專家顧問(wèn) (正式寫手)
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4樓2015-11-06 23:23:18
6樓2015-11-07 07:46:55
9樓2015-11-08 08:29:03
10樓2015-11-08 08:30:47
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