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hong_lue木蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
昆蟲(chóng)表達(dá)重組bacmid質(zhì)粒通用引物M13進(jìn)行pcr
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我最近在做昆蟲(chóng)表達(dá)，但是PCR驗(yàn)證總出問(wèn)題。 在DH 10bac里產(chǎn)生重組質(zhì)粒，用的pFastBac Dual和pFastBac HTA轉(zhuǎn)入DH 10bac感受肽中。通過(guò)藍(lán)白斑二次篩選出白克隆，用通用引物M13: F 5'－CCCAGTCACGACGTTGTAAAACG-3' R 5'－AGCGGATAACAATTTCACACAGG-3'按照invitrogen的說(shuō)明做的。用的pfu酶菌液pcr，總是出現(xiàn)很亮的引物二聚條帶，而且目的基因在3400和4800，條帶位置也不正確。結(jié)果很不穩(wěn)定。 求交流求指教 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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