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yly1991yd木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
Fluo 3/AM可不可以在普通熒光顯微鏡下看到熒光呢
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如題，小妹剛剛開(kāi)始準(zhǔn)備用Ca離子探針標(biāo)記胞內(nèi)Ca離子，實(shí)驗(yàn)基本參照網(wǎng)上前輩的的步驟，F(xiàn)luo-3/AM最終濃度為2uM，還加了助轉(zhuǎn)運(yùn)的F-127終濃度為0.02%，然后37度培養(yǎng)了45min，洗了兩遍，37度又培養(yǎng)了45min左右，然后在普通的熒光顯微鏡下沒(méi)有看到熒光。 正在總結(jié)原因。不知道是操作的問(wèn)題還是顯微鏡的問(wèn)題（師姐說(shuō)細(xì)胞太少了），一般看文獻(xiàn)上都用的激光共聚焦，所以不知道普通的熒光顯微鏡是不是看不到啊~ 求大神相助，或者做過(guò)知道步驟分享一下也可以 還有一個(gè)問(wèn)題就是我買的1mM的Fluo3/AM儲(chǔ)備液，DMSO溶的，可以反復(fù)凍融使用嘛，因?yàn)榉盅b的話沒(méi)太想好怎么分法… 謝謝啦  |
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