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RNAi rescue不能rescue干擾后表型
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我構(gòu)建了蛋白A和蛋白A RNAi resistant（siRNA對應(yīng)的mRNA中密碼子做了改變，導(dǎo)致siRNA不能干擾此蛋白，但編碼的氨基酸和野生型一致）的細(xì)胞系，盡管在正常細(xì)胞或者過表達(dá)蛋白A的細(xì)胞中，干擾蛋白A（Western Blot已多次驗證干擾效果很好）導(dǎo)致雙核細(xì)胞的產(chǎn)生，但是在蛋白A RNAi resistant的細(xì)胞中（Western Blot已多次驗證siRNA不能干擾此蛋白），但是仍然不能夠rescue雙核的產(chǎn)生。我們開始懷疑siRNA脫靶，但是文獻(xiàn)中已有報道干擾蛋白A確實能誘導(dǎo)雙核的產(chǎn)生（siRNA序列和我們的不一致）。 請問各位蟲友，有人遇到過類似的問題嗎？求解答！ |
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