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xiaomao225新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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這樣的倆個(gè)引物能P出來(lái)模板嗎？為什么 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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xiaomao225
新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
2樓2015-11-30 09:48:23
jianguochen
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaomao225: 金幣+40, ★★★很有幫助 2015-11-30 19:41:58
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xiaomao225: 金幣+40, ★★★很有幫助 2015-11-30 19:41:58
| 理論上來(lái)說(shuō)，引物3‘端對(duì)錯(cuò)配要求嚴(yán)格，特別是末端的一個(gè)一兩個(gè)堿基錯(cuò)配都可能無(wú)法擴(kuò)增。沒(méi)看錯(cuò)的話，你引物3’端二十多個(gè)堿基不匹配，所以應(yīng)該是擴(kuò)不出來(lái)的。調(diào)過(guò)來(lái)，不匹配在5‘端倒是沒(méi)什么。不過(guò)樓主這么做的目的是什么呢，如果只是擴(kuò)增模板的話BC和EF即可。 |
3樓2015-11-30 10:06:57
4樓2015-11-30 11:59:51
a314919473
銀蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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5樓2015-11-30 16:34:38
jackeyun
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這個(gè)是擴(kuò)不出來(lái)的。如果要對(duì)你圖里的兩個(gè)部分做突變，需要設(shè)計(jì)六條引物，兩輪pcr 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
6樓2015-11-30 18:47:39
xiaomao225
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7樓2015-11-30 19:38:30
xiaomao225
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恩，我只是用模板（空載體）做模板也P出來(lái)了，不知道是怎么回事，我只是想證明下以這樣的載體作模板P不出來(lái)才對(duì)。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
8樓2015-11-30 19:41:30
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