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scwer新蟲 (初入文壇)
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[求助]
洋蔥花藥剝?nèi)〖记?百合科也行 已有1人參與
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我要做的是研究洋蔥雄性不育，通過對(duì)不育系和可育系進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序來(lái)找出雄性不育相關(guān)基因。材料是不育和可育的花藥（懂的人知道撥這個(gè)有多麻煩）。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序要求樣品最少0.5g，但剝?nèi)∠聛?lái)的洋蔥花藥特別容易失活，導(dǎo)致里面RNA降解十分嚴(yán)重，從而無(wú)法進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。本人在這里懇求一個(gè)剝?nèi)⊙笫[花藥快速且不易失活的方法，因?yàn)椴牧咸y弄到，一次不成功還要再等一年，所以懇求大神指點(diǎn)！��！ |
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ZZCQQ
木蟲 (正式寫手)
早起噠蟲砸有鳥吃(⊙o⊙)
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- 專業(yè): 中藥藥代動(dòng)力學(xué)
2樓2015-12-04 11:01:56
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3樓2015-12-06 15:34:53
【答案】應(yīng)助回帖
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我是專門做測(cè)序服務(wù)的，以下建議希望可以幫到樓主： 植物樣品的收集方法：將組織放入1.5ml或2.0ml RNase-free的EP管中，每管100mg左 右，準(zhǔn)確標(biāo)記，加入RNAlater或類似的RNA組織保存試劑，液氮速凍 后使用封口膜封口，將EP管放置于50ml離心管中或密封性好的小塑料袋中，干冰運(yùn)輸。 對(duì)于花藥和樓主描述的難點(diǎn)，建議先在EP管里裝入RNA later，每次收集的花藥取下后立即導(dǎo)入管中，震蕩；反復(fù)多次即收集一管，多管累積達(dá)到測(cè)序要求的量。也就是說(shuō)你把管子拿在手里，接著花藥，直接入管。 希望跟樓主合作，荷花我都做過的，哈哈 |
4樓2016-01-13 21:24:46
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