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我是用自己合成引物的方法，照著Clontech 的SMARTer RACE 試劑盒說明書做的RACE,現(xiàn)在5’RACE做出來了，就是3‘race一直沒有條帶，有沒有哪位大神的3’RACE做成功了，是否能夠提供些經(jīng)驗(yàn)？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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為什么說明書上3race要用upm長(zhǎng)短接頭的mix去做？3端的引物設(shè)計(jì)是和cDna上游一樣的嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2015-12-07 20:31:35
我們沒有去買試劑盒，所以東西都是自己配的，3‘race部分沒有按照試劑盒說明書上的做，因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)拿UPM和3’GSP擴(kuò)出來的條帶測(cè)序后完全是沒有信號(hào)，或者只有一部分看不懂的參考序列，所以我們導(dǎo)師設(shè)計(jì)了一個(gè)和3‘接頭互補(bǔ)的引物與3’GSP一起擴(kuò)，但是一直沒有條帶，現(xiàn)在真的是好捉急啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2015-12-06 18:27:13
3樓2015-12-07 11:27:07
4樓2015-12-07 19:44:07
能不能告訴我下5’UTR著么判斷是否全了，拿這個(gè)試劑盒克隆了好幾個(gè)基因的序列，5‘RACE結(jié)果已經(jīng)看到試劑盒帶的上游引物，ORF框也是全的 就是不知道5-UTR是不是全的。。 5樓2015-12-07 19:47:06
6樓2015-12-07 20:28:20
8樓2015-12-08 10:34:15
9樓2015-12-08 10:35:35
dushangyun
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10樓2015-12-08 10:41:06
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