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upgo123金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
熒光定量qPCR內(nèi)參基因的CT問(wèn)題及熔解曲線 已有1人參與
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大家好，小弟最近做熒光定量PCR，相對(duì)定量，SYBR GREEN I，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)問(wèn)題： 1，內(nèi)參基因的CT值為24，大于目的基因的CT值20，結(jié)果能用嗎？為什么？ 2，有一個(gè)目的基因（不是上述目的基因）的溶解溫度為93℃，結(jié)果能用嗎？為什么？ 網(wǎng)大俠不吝賜教，謝謝！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
upgo123: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝，我已經(jīng)做了，可是93℃那個(gè)平行性不理想 2015-12-10 11:06:04
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
upgo123: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝，我已經(jīng)做了，可是93℃那個(gè)平行性不理想 2015-12-10 11:06:04
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1、結(jié)果可用，并沒(méi)有關(guān)系。 2、這樣看來(lái)你這條目的基因片段很長(zhǎng)或者說(shuō)GC含量高，這其實(shí)都是要避免的（可能潛在增加二級(jí)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜i性），而且這個(gè)溫度接近做溶解曲線的最高溫（95度），建議避免使用。 |
2樓2015-12-09 18:32:13
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