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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 設計帶有一段標簽的引物
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設計帶有一段標簽的引物
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現(xiàn)在想設計一對引物，在目的基因序列的C端加一段linker（GSSGSGSGSGSG），想加上其對應的一段基因序列GGATCCAGCGGCTCAGGATCTGGATCAGGATCTGGC，即：保護堿基+酶切位點+這段標簽序列+目的序列保守區(qū)序列�，F(xiàn)在我的疑問是：目的序列保守區(qū)序列不是要與互補鏈的互補且從N端寫到C端，例如需要擴增的目的序列是ATTCAG.......CCAATTG,那么下游引物就是;保護堿基+酶切位點+(Linker???)+CAATTGG,現(xiàn)在我不知道我這段linker序列怎么加？也互補倒過來寫嗎？我最后要的序列是這樣（CCATGG）NcoI酶切位點......CCACTGACATGGCGCTGCTGCGGG......（ GGATCCAGCGGCTCAGGATCTGGATCAGGATCTGGC ）linker (CATATG)NdeI酶切位點 麻煩大家?guī)臀医獯鹣孪掠我镏衛(wèi)inker序列怎么放？ |
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