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yuxiaofeng鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
離子交換層析法從酪蛋白中分離純化αs1-酪蛋白 已有1人參與
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我現(xiàn)在想用離子交換層析法從酪蛋白中分離純化αs1-酪蛋白，有沒有人可以幫我設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案，非常感謝！ |
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hc-material
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【答案】應(yīng)助回帖
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陰陽離子交換的都試： 1.將你的樣品用PH7.0的20mMPBS加氯化鈉50mM溶解你的樣品，若液體的可以直接置換成這個(gè)體系（抽濾，在用這個(gè)溶解） 2.層析介質(zhì)Q高流速瓊脂糖微球和SP高流速瓊脂糖微球。買回來裝柱，然后用溶解樣品的緩沖液平衡柱子。 3.上樣 4.洗脫，用溶解樣品的緩沖液加50,100,150,200，250,300,350,400,450,500mM氯化鈉分別洗脫，收集洗脫峰，每個(gè)洗5個(gè)柱體積，然后分別檢測(cè)，看你要的蛋白在那個(gè)梯度氯化鈉濃度里面，若有條件AKTA蛋白純化儀，可連續(xù)梯度。 5.確定了用陰離子還是陽離子后。可以嘗試弱陰的DEAE(對(duì)應(yīng)Q）或若陽的（對(duì)應(yīng)CM)，然后在安4的流程走一邊，看純度，然后改變PH啊，鹽濃度啊優(yōu)化。 6.過完了用葡聚糖G25把氯化鈉置換掉。就這么簡單。祝順利 |
2樓2015-12-16 15:32:57
yuxiaofeng
鐵蟲 (初入文壇)
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3樓2015-12-16 17:02:24
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