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Meckett新蟲 (正式寫手)
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[求助]
PMP單糖衍生化出現(xiàn)了問題但不知道是什么問題,求助大家!
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“取鹽酸氨基葡萄糖適量,精密稱定,加水制成每1mL含5mg的溶液作為內(nèi)標(biāo)溶液。另取單糖對(duì)照品約5mg,精密稱定,置10mL量瓶中,精密加入內(nèi)標(biāo)溶液0.5mL,加水適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻,吸取500μL,加0.5mol/L的PMP甲醇溶液與0.6mol/L的氫氧化鈉溶液各500μL;靹,70℃烘箱內(nèi)衍生反應(yīng)100mn,再加0。3mol/L的鹽酸溶液1000μL,混勻,再用三氯甲烷洗滌3次,每次2mL,棄去三氯甲烷液,水層離心后,取上清液20μL,注入液相色譜儀。” 以上步驟我嚴(yán)格參照文獻(xiàn)來做。上個(gè)周六做起來沒有任何問題,進(jìn)了液相圖也很好看。可是我上周日繼續(xù)做其他幾份單糖樣品時(shí),在烘箱內(nèi)衍生結(jié)束冷卻后,我加入一毫升鹽酸后整個(gè)溶液就呈現(xiàn)藍(lán)色,而之前做成功的樣品加入鹽酸后顏色是應(yīng)該沒有改變的。進(jìn)了液相也見不到糖的衍生物吸收峰。 后來發(fā)現(xiàn)溶液的顏色變化是由ph導(dǎo)致的。求助各位大神,pmp衍生化后應(yīng)該在怎樣一個(gè)ph條件下進(jìn)行氯仿的萃取以保證衍生產(chǎn)物不會(huì)被氯仿萃取掉呢?又或是我這個(gè)操作還有哪里有什么問題呢?求助求助。。。! |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (正式寫手)
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