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[求助]
PMP單糖衍生化出現(xiàn)了問題但不知道是什么問題，求助大家！
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“取鹽酸氨基葡萄糖適量，精密稱定，加水制成每１ｍＬ含5ｍｇ的溶液作為內標溶液。另取單糖對照品約5ｍｇ，精密稱定，置１０ｍＬ量瓶中，精密加入內標溶液0.5ｍＬ，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取5００μＬ，加０.５ｍｏｌ/L的ＰＭＰ甲醇溶液與0.6ｍｏｌ/Ｌ的氫氧化鈉溶液各5００μＬ。混勻，７０℃烘箱內衍生反應１００ｍｎ，再加０。３ｍｏｌ/Ｌ的鹽酸溶液10００μＬ，混勻，再用三氯甲烷洗滌３次，每次２ｍＬ，棄去三氯甲烷液，水層離心后，取上清液2０μＬ，注入液相色譜儀�！� 以上步驟我嚴格參照文獻來做。上個周六做起來沒有任何問題，進了液相圖也很好看。可是我上周日繼續(xù)做其他幾份單糖樣品時，在烘箱內衍生結束冷卻后，我加入一毫升鹽酸后整個溶液就呈現(xiàn)藍色，而之前做成功的樣品加入鹽酸后顏色是應該沒有改變的。進了液相也見不到糖的衍生物吸收峰。 后來發(fā)現(xiàn)溶液的顏色變化是由ph導致的。求助各位大神，pmp衍生化后應該在怎樣一個ph條件下進行氯仿的萃取以保證衍生產物不會被氯仿萃取掉呢？又或是我這個操作還有哪里有什么問題呢？求助求助�。。。�！  |
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