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litumiyuan新蟲 (初入文壇)
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肽產(chǎn)物的釋放 已有1人參與
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肽產(chǎn)物的釋放 肽鏈組裝完成后必須將Linker裂解，切除固相載體后才能獲得游離肽或全保護(hù)肽的產(chǎn)物，肽合成中的Linker裂解方式比較簡單，主要集中在酸解、皂化、氨解或肼解、酯交換幾種方式，此外在某些情況中也用NaBH4還原方式制備肽醇。 一、酸解方式 固相肽合成中最重要、應(yīng)用最廣泛的裂解反應(yīng)是在各種酸條件中完成的。采用此種裂解方式主要有兩個原因：一時適用于絕大多數(shù)載體類型；二是側(cè)鏈保護(hù)基與載體被同時脫除，可以得到接近天然結(jié)構(gòu)的活性肽產(chǎn)物。肽鏈上的樹脂不同則需要不同的酸試劑，如Trt型樹脂需<20%的TFA裂解，Wang樹脂用80%~95%的TFA，Merrifield樹脂需要你低濃度HF或TFMSA，而PAM及MBHA樹脂則需要高濃度HF或TFMSA才能完成裂解。此外，因為不同的肽側(cè)鏈保護(hù)基對裂解試劑的敏感性不同，需要配置不同的酸解配方。 二、低-高酸解法 主要針對Boc保護(hù)策略合成的全保護(hù)肽樹脂的酸解反應(yīng)，以HF或TFMSA為酸試劑，以苯甲醚或?qū)追訛榍宄齽�，此為SN1型強(qiáng)酸裂解。但此過程酸解后，除了正常的肽產(chǎn)物外，還有多種副產(chǎn)物伴生，嚴(yán)重影響了裂解產(chǎn)物的收率。以30%的二甲硫醚（DMS）作為Lewis堿時，即可消除芐正碳離子對產(chǎn)物的影響，反應(yīng)機(jī)理變?yōu)镾N2。此時酸液改為TFA，故稱為低酸裂解。 三、Fmoc策略肽樹脂的裂解 以α-N-Fmoc氨基酸為構(gòu)件的固相肽合成均用弱酸敏感型的Linker載體，如Wang樹脂、CTC樹脂等，它們均可以被TFA裂解。清除劑可根據(jù)肽側(cè)鏈保護(hù)基的不同進(jìn)行選用。 我們杭州睿凱干細(xì)胞生物科技有限公司[url=http://www.stemcells-cn.com/]，是一家專注于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研發(fā)與產(chǎn)業(yè)化的高科技生物公司。我們公司的主要產(chǎn)品是全合成的干細(xì)胞培養(yǎng)試劑系列[url=http://www.stemcells-cn.com/chanpinzhongxin-244374-96294.html]，產(chǎn)品均為人工合成的高活性多肽組成。用我公司產(chǎn)品培養(yǎng)的干細(xì)胞，可以做到安全培養(yǎng)，甚至可以直接應(yīng)用于臨床。所有我們的產(chǎn)品比一般多肽產(chǎn)品要求會更加高，要確保多肽的活性以及純度。 我們的采用的是α-N-Fmoc氨基酸為構(gòu)件，故裂解液選用的是E液和F液，其配方為 E液：87.5%TFA 5%苯甲硫醚 2.5%EDT 2.5%苯酚 2.5%水（現(xiàn)在在裂解液中加入2.5%的TIS） F液：95%TFA 3%Tis 2%水（肽鏈中沒有Met、Cys可以用） 若肽鏈中保護(hù)基較多，可將E液中的苯甲硫醚完全替換成EDT，亦可加入適量的Tis ，但TFA不得少于85%。 |
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2樓2017-06-17 14:25:27
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