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zhuqiyu銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
流式檢測(cè)A2780細(xì)胞的CA125表達(dá)，檢測(cè)不到熒光細(xì)胞 已有2人參與
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A2780細(xì)胞用CA125一抗4度孵育過(guò)夜，第二天用二抗室溫孵育近兩小時(shí)，流式上機(jī)檢測(cè)不出陽(yáng)性細(xì)胞，現(xiàn)在分析有以下幾個(gè)原因： 1、一抗或二抗的濃度太低，一抗是2μg/100μL，二抗是1:100體積。 2、A2780不表達(dá)CA125。 3、CA125在細(xì)胞膜上表達(dá)，并且會(huì)大量釋放到培養(yǎng)基里，這樣是否會(huì)導(dǎo)致膜上表達(dá)量很低，檢測(cè)不出來(lái)。 因是第一次做流式間接標(biāo)記熒光，對(duì)抗體使用濃度沒(méi)經(jīng)驗(yàn)，抗體說(shuō)明書(shū)上沒(méi)有流式濃度的要求，是否還有其他的原因?qū)е聶z測(cè)不出來(lái)？請(qǐng)各位指教！ |
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5樓2015-12-23 09:22:47
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