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免疫沉淀的重輕鏈干擾如何排除 已有2人參與
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做免疫沉淀時,如果靶蛋白大小剛好在重鏈附近(50~55kDa)或輕鏈附近(~30kDa)時,顯影后不太好區(qū)分到底是靶蛋白、還僅僅是抗體的重鏈/輕鏈。 本人目前做法:采用HRP-ProA和鼠抗兔輕鏈二抗,兩種替換使用:靶蛋白如果在重鏈附近,就用鼠抗兔輕鏈二抗(理論上只結(jié)合輕鏈,但實際上還是對重鏈有一些結(jié)合); 靶蛋白如果在輕鏈附近或其他大小,就用HRP-ProA(理論上對輕鏈結(jié)合非常弱,但實際上還是比較強)。 不知各位有什么更好的解決辦法嗎? |
木蟲 (正式寫手)

無蟲 (初入文壇)
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