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《PCR技術(shù)實驗指南》(美)C.W.迪芬巴赫+G.S德威克勒斯 分享
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本書是美國冷泉港實驗室出版社PCR Primer:A Laboratory Manual的影印本。本書由從事PCR研究的專家們共同研討和撰稿,是一部最新、最權(quán)威的PCR技術(shù)實驗手冊。其內(nèi)容從最簡單的PCR操作到最新的技術(shù)改進(jìn),從最基本的PCR技術(shù)到各種奇思妙想的PCR應(yīng)用技巧,無所不至,令讀者目不暇接、備受啟迪。具體內(nèi)容包括PCR 導(dǎo)論、樣品的制備、引物設(shè)計、PCR產(chǎn)物檢測(定量和分析)、RNA樣品的PCR、PCR介導(dǎo)的克隆、PCR法制備突變體、其他擴(kuò)增技術(shù)等。每個操作都配有疑難解析和完整的參考文獻(xiàn)以供答疑、檢索。 本書是《分子克隆實驗指南》的姊妹篇,可供從事分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)以及醫(yī)學(xué)各個領(lǐng)域研究的科研與教學(xué)人員參考,既是實驗室必備的工具書,也是研究人員開闊眼界、拓展思路的不可不讀之經(jīng)典。 目錄 第1篇 PCR導(dǎo)論 1 建立一個PCR實驗室 2 PCR殘留污染的處理:一種酶學(xué)策略 3 高保真PCR酶 4 PCR的最優(yōu)化和常見問題解析 5 富含GC片段的PCR擴(kuò)增 6 精確擴(kuò)增大片段的技巧 7 PCR引物設(shè)計 8 PCR擴(kuò)增DNA的非放射性循環(huán)測序 第2篇 樣品的制備 9 DNA的純化 10 RNA的純化 11 激光捕獲微分離技術(shù)原位定位基因表達(dá) 12 克服PCR受抑制的策略 第3篇 RT-PCR方法 13 相對定量RT-PCR和競爭定量RT-PCR內(nèi)對照的使用 14 四種實時PCR檢測系統(tǒng)的比較:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler 15 定量PCR的新技術(shù) 16 RNA的擴(kuò)增:用鎂激活的熱穩(wěn)定DNA聚合酶進(jìn)行高溫反轉(zhuǎn)錄和DNA擴(kuò)增 第4篇 PCR產(chǎn)物的檢測:專門應(yīng)用 17 雜合性的丟失:一種鑒定腫瘤基因組上染色體區(qū)段缺失的多重PCR方法 18 單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析 19 逆轉(zhuǎn)錄酶原位PCR 20 靈敏快速的突變檢測方法——錯配位點的固相化學(xué)切割法 第5篇 用PCR分析基因的差異表達(dá) 21 PCR在基于微陣列的基因表達(dá)分析中的應(yīng)用 22 利用抑制性消減雜交技術(shù)鑒定差異表達(dá)的基因 23 基因表達(dá)分析中的熒光mRNA差異顯示技術(shù) 第6篇 用PCR進(jìn)行克隆 24 以PCR為基礎(chǔ)的文庫篩選方法 25 經(jīng)典RACE(cDNA末端快速擴(kuò)增)法的改進(jìn) 26 用PCR合成和分析DNA文庫 第7篇 PCR產(chǎn)物的克隆 27 克隆PCR產(chǎn)物的策略 28 PCR產(chǎn)物雙向和定向克隆 29 核糖克隆:用含有一個核糖核苷酸末端的PCR引物進(jìn)行DNA克隆和基因構(gòu)建 第8篇 利用PCR進(jìn)行誘變 30 誘變PCR 31 快速PCR定點突變 32 利用PCR來突變和合成新的重組基因 33 流線型基因裝配PCR 附錄1 專利 附錄2 在PCR中使用的寡核苷酸的修飾 附錄3 注意事項 附錄4 供應(yīng)商 |
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