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tylll銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
A7r5凍存后復(fù)蘇,大面積死亡
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最近在養(yǎng)A7r5,收到細(xì)胞后用DMEM+10%GIBCO血清培養(yǎng)及凍存(1x10^6每管,1:9=DMSO:FBS),倍增時(shí)間約48h,復(fù)蘇后細(xì)胞大片死亡,一管細(xì)胞在6cm皿中要長(zhǎng)兩周左右才能長(zhǎng)滿,檢測(cè)沒有支原體污染,請(qǐng)問這是為什么呢? 看別人用相同條件養(yǎng)的挺好的,是需要加入明膠等基質(zhì)或NEAA、谷氨酰胺、β-ME之類的試劑嗎? 我昨天復(fù)蘇了2x10^6到6cm皿,今天觀察很多細(xì)胞貼在皿底沒有伸展開,估計(jì)明天又會(huì)死一大片, 請(qǐng)教一下內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)條件中需要加些什么試劑?你們的培養(yǎng)條件是怎么樣的?著急喲。 |

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銅蟲 (初入文壇)

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