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z1513875鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
本人第一次用λ-red重組系統(tǒng)構(gòu)建缺失菌株，有幾個問題想請教大家，希望能得到幫助。
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1.pKD3質(zhì)粒圖譜中只有氨芐抗性基因，為什么資料顯示它含有氯霉素基因？ 2.pKD3質(zhì)粒中的引物設(shè)計需要包含兩個RFT在內(nèi)，即FRT+抗性片段+RFT，那么對第一個FRT的上游基因片段和第二個FRT下游的基因片段有什么要求沒，具體該怎么設(shè)計？ AGATTGCAGCATTACACGTCTTGAGCGATTGTGTAGGCTGGAGCTGCTTCGAAGTTCCTATACTTTCTAGAGAATAGGAACTTCGGAATAGGAACTTCATTTAAATGGCGCGCCTTACGCCCCGCCCTGCCACTCATCGCAGTACTGTTGTATTCATTAAGCATCTGCCGACATGGAAGCCATCACAAACGGCATGATGAACCTGAATCGCCAGCGGCATCAGCACCTTGTCGCCTTGCGTATAATATTTGCCCATGGTGAAAACGGGGGCGAAGAAGTTGTCCATATTGGCCACGTTTAAATCAAAACTGGTGAAACTCACCCAGGGATTGGCTGAGACGAAAAACATATTCTCAATAAACCCTTTAGGGAAATAGGCCAGGTTTTCACCGTAACACGCCACATCTTGCGAATATATGTGTAGAAACTGCCGGAAATCGTCGTGGTATTCACTCCAGAGCGATGAAAACGTTTCAGTTTGCTCATGGAAAACGGTGTAACAAGGGTGAACACTATCCCATATCACCAGCTCACCGTCTTTCATTGCCATACGTAATTCCGGATGAGCATTCATCAGGCGGGCAAGAATGTGAATAAAGGCCGGATAAAACTTGTGCTTATTTTTCTTTACGGTCTTTAAAAAGGCCGTAATATCCAGCTGAACGGTCTGGTTATAGGTACATTGAGCAACTGACTGAAATGCCTCAAAATGTTCTTTACGATGCCATTGGGATATATCAACGGTGGTATATCCAGTGATTTTTTTCTCCATTTTAGCTTCCTTAGCTCCTGAAAATCTCGACAACTCAAAAAATACGCCCGGTAGTGATCTTATTTCATTATGGTGAAAGTTGGAACCTCTTACGTGCCGATCAACGTCTCATTTTCGCCAAAAGTTGGCCCAGGGCTTCCCGGTATCAACAGGGACACCAGGATTTATTTATTCTGCGAAGTGATCTTCCGTCACAGGTAGGCGCGCCGAAGTTCCTATACTTTCTAGAGAATAGGAACTTCGGAATAGGAACTAAGGAGGATATTCATATGGACCAT 是不是只要擴增上述序列中的劃線部分以及同源臂就可以了？ 3.轉(zhuǎn)入pC20后，抗性基因片段和其中的一個FRT會消除，那么這段消除的基因如何計算bp大�。� 本人事新手，希望大家給予幫助！ |
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2樓2016-01-08 14:38:37
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