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bjpkpd鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
請問LC-MS回收率的問題 已有1人參與
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| 請問各位蟲友，我目前在做大鼠血藥濃度方面的實驗，用LC-MS/MS（ab4000），在做血樣前處理時，用HPLC摸索前處理條件，用乙酸乙酯萃取，然后在HPLC上考察提取回收率可達(dá)到88%左右，目前用LC-MS/MS做正式實驗，考察提取回收率僅有10%，還嘗試過乙腈沉淀蛋白，直接取上清進(jìn)樣，也只有10%左右，搞不懂什么原因造成差別如此之大，是機(jī)制效應(yīng)嗎？對了，液質(zhì)用的流動相也是乙腈。希望蟲友給予解答，不勝感激 |
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提取液是同一批次的嗎？你質(zhì)譜是提取離子定量的？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2015-12-24 10:38:06
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像你這樣的情況，有一個很簡單的驗證方法。HPLC-DAD-MS/MS就OK了，雙檢測器。我這邊的基本上都是雙檢測器。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2015-12-24 10:43:11
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是不是基質(zhì)影響。你分別用標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)過前處理的空白樣品，經(jīng)過前處理后加標(biāo)樣品，進(jìn)液相和質(zhì)譜。就知道了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2015-12-24 10:46:50
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5樓2015-12-24 14:16:48
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6樓2015-12-24 14:18:21
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個人覺得不會是基質(zhì)效應(yīng)。你是怎么處理的？目標(biāo)物是極性的還是？回收率實驗怎么做的？如果你覺得是基質(zhì)干擾，造成質(zhì)譜信號不好。首先你要保證，你的物質(zhì)適合用液質(zhì)測。其次，過一下C18柱，去除強(qiáng)電離物質(zhì)，它會抑制離子化。還有就是，會不會是乙酸乙酯的問題，旋蒸之后，換種溶劑。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
7樓2015-12-24 15:42:06
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