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4片段裝配 共18kb轉化大腸桿菌不長菌落,求助各位!
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最近在做感染性克隆的構建,用NEB公司的HIFI golden gate assembly mix 作為裝配液,裝配三個片段到一個載體上,片段每段大約5000bp,載體大約3500bp,將三個片段和一個載體加到一起進行裝配后轉化DH5a,但是總是不長。請問是什么原因,是感受態(tài)的效率的問題嗎?是不是換個感受態(tài)或換成電轉化會好一點?希望各位高手可以幫忙分析一下!十分感謝 |
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