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求教配方是否有問題
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這是跑完之后的條帶,目標(biāo)蛋白大概3000左右…求解釋… 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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3C丙烯酰胺儲存液:24g丙烯酰胺+0.75g甲叉雙丙烯酰胺加水定容至50ml過濾 4℃保存 6C 凝膠儲存液:23.25g丙烯酰胺+1.5g甲叉雙丙烯酰胺加水定容到50ml過濾4℃保存。 30%凝膠緩沖溶液:取30g丙烯酰胺,0.8g甲叉雙丙烯酰胺,先用約50mLdH2O溶解,如溶解不完全,可加熱至30~50℃溶解,在定容至100mL,然后過濾,置于棕色瓶,4℃下保存?zhèn)溆谩?br /> 凝膠緩沖溶液:36.342g Tris +0.3g SDS加水定容到100ml,HCl調(diào)pH至8.45 過濾4℃保存。 3X凝膠緩沖液液:18.15g Tris,0.15gSDS,溶于40ml水中,用1mol/L的HCL滴定至PH8.45再加水至50ml。陽極電泳緩沖溶液:0.2M Tris (pH 8.9)(12.114g Tris) 加水定容到500ml 4℃保存。 陰極電泳緩沖溶液: 0.1M Tris+0.1M Tricine +0.1%SDS 不用調(diào)pH 6.057 Tris+8.96gTricine +0.5gSDS 加水定容到500ml 4℃保存。 10%(m/V)過硫酸銨(AP) 溶液:取2g過硫酸銨于dH2O溶解后,定容至20mL,現(xiàn)配現(xiàn)用。 1mol/LHCl 500mL:取濃HCl(36%~38%)42mL,慢慢加入蒸餾水中,邊加邊攪拌,加dH2O定容至500mL,在通風(fēng)櫥中操作。 10%(m/V)SDS溶液:取5gSDS加dH2O定容至50mL(加熱溶解) 10%(m/V)TEMED(四甲基乙二胺):用dH2O配20mL(師姐有) 染色液:取1g考馬斯亮藍(lán)R-250,加入450mL甲醇和100mL冰乙酸,用去離子水定容至1000mL。脫色液:29.2gNaCl,加去離子水定容到1000mL。 樣品溶解液:取SDS 2g,β-巰基乙醇5mL,甘油10mL,溴酚藍(lán)0.1g、0.5mol/LTris-HCl (pH 6.8)緩沖液10mL,加去離子水25mL,使總體積為50mL,裝于棕色瓶。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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