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迷你騎士新蟲 (初入文壇)
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[交流]
淀粉凝膠電泳具體方法�。�！
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各位大神，本人最近參考文獻(xiàn)做血紅蛋白的淀粉凝膠電泳（其他電泳均試過不能滿足要求，只好照文獻(xiàn)做，知道這種方法已經(jīng)很少人用） 有誰做過這種電泳，我想問幾個(gè)問題 ： a）淀粉我用的是國(guó)產(chǎn)標(biāo)注用于電泳的馬鈴薯淀粉，不知微波爐加熱多久合適，試過加熱兩分鐘，冷卻后也無法凝結(jié)成膠，想試試更短時(shí)間，希望大神提供一個(gè)參考值！ b）蛋白上樣，為了不漂孔，用了甘油，另外還有pH8.8的buffer，按道理蛋白應(yīng)該帶上負(fù)電荷，電泳過程中向正極移動(dòng)，但是我的樣品在電壓110V（~6V/cm2)下，2小時(shí)也只運(yùn)動(dòng)了半個(gè)厘米。文獻(xiàn)中用的上樣方法是用濾紙條吸取蛋白液插入樣品孔（但是沒有提蛋白用了什么buffer），想問問做過的大神知道解決這個(gè)問題！�。� c）跑完后的染色，我用的是考馬斯亮藍(lán)，理論上也是可以染的，但是染色后很難脫色，畢竟膠比較厚，文獻(xiàn)用氨基黑10B，理論靈敏度不及考馬斯亮藍(lán)。想問問大神用啥染用啥脫色�。� 以上問題希望得到大家的解答，即使沒做過也可以根據(jù)理解給個(gè)建議，我在此先謝過了�。� PS 發(fā)現(xiàn)自己沒有金幣了。。。拼個(gè)人品吧！ |
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