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美琪琪新蟲 (初入文壇)
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[求助]
定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線所算的濃度與稀釋濃度不一樣怎么回事啊？跪求大神們幫我解決下？
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稀釋濃度 CQ值 X值（（b-y）/k） 拷貝數(shù) 6.7x107 10000000 13.45 6.005880623 1013632.725 6.7x106 1000000 16.91 4.988532784 97394.13045 6.7x105 100000 20.38 3.968244634 9294.898121 6.7x104 10000 23.45 3.06556895 1162.971174 6.7x103 1000 27.49 1.877683034 75.4541332 6.7x102 100 30.22 1.074977948 11.8844188 6.7x101 10 33.4 0.139958836 1.380253432 以上數(shù)據(jù)；10倍稀釋了標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒的濃度的， CQ值是做標(biāo)曲時(shí)的值， x是根據(jù)y=-3.401x+33.876 帶入CQ值得到的 ，然后就是算出拷貝數(shù)濃度， 但是問題出來了，假如我把CQ值等于27.49（以上CQ值），但是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線算出的濃度等于75.5個(gè)拷貝數(shù)，但是在稀釋濃度是10的3次方啊，同理，在CQ值等于33.4時(shí)，所算出的拷貝數(shù)是1.3個(gè)拷貝數(shù)，但是我的標(biāo)曲上是最低拷貝數(shù)是67個(gè)拷貝數(shù)啊，顯然不對了，怎么回事�。� 急死了，6月份畢業(yè)，在等文章了。跪謝大神幫忙解答了�。�！ 在線等待！！  |
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jackyoung
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- 專業(yè): 園藝學(xué)與植物營養(yǎng)學(xué)
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手機(jī)上看表效果不是很好，所以就不說數(shù)據(jù)本身了。 請考慮稀釋倍數(shù)的范圍，引物括增效率高低影響會很大，通常在一個(gè)比較小的范圍內(nèi)才可接受。建議稀釋倍數(shù)控制一下，比如2倍或4倍梯度稀釋，大約5-7個(gè)點(diǎn)吧，應(yīng)該還能接受。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-01-01 23:20:30
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