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MR_zang新蟲 (初入文壇)
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[求助]
蛋白走分子篩純化 已有2人參與
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| 小弟用G-75純化我的目的蛋白。目的蛋白是經(jīng)過SUMO酶酶切后的,因?yàn)楹须s蛋白,目的蛋白分子量1.4KDa、雜蛋白分子量3.5KDa、4.5KDa。過了G-75后,沒有洗脫峰,就用0.1mol/l 的NaOH洗了一遍,有洗脫峰。就覺得一開始的洗脫液(UP水)環(huán)境,蛋白會(huì)不穩(wěn)定,就用了2mol/l的尿素作為蛋白的緩沖液和洗脫液,但還是沒有東西洗脫出來,就感覺填料有問題(調(diào)料一開始的時(shí)候出現(xiàn)了干柱和填料壓縮的狀況),但老板也沒說換填料了,求解原因。 |
專家顧問 (職業(yè)作家)
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專家經(jīng)驗(yàn): +1860 |
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干柱最好重裝,壓縮是因?yàn)檎{(diào)料在不同溶劑里面的潤(rùn)脹不一樣,建議換個(gè)緩沖液,多沖一些時(shí)間,也可以用小柱先試試。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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