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普雅2015新蟲 (正式寫手)
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[求助]
大腸桿菌的轉(zhuǎn)染 已有1人參與
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從-70℃冰箱中取200μl 感受態(tài)細胞懸液,室溫下使其解凍,解凍后立即置冰上。 2、 加入pBS 質(zhì)粒DNA 溶液(含量不超過50ng,體積不超過10μl),輕輕搖勻,冰上放置30 分鐘后。 3、42℃水浴中熱擊90 秒或37℃水浴5 分鐘,熱擊后迅速置于冰上冷卻3-5 分鐘。 4、向管中加入1ml LB 液體培養(yǎng)基(不含Amp),混勻后37℃振蕩培養(yǎng)1 小時,使細菌恢復正常生長狀態(tài),并表達質(zhì)粒編碼的抗生素抗性基因(Ampr )。 5、將上述菌液搖勻后取100μl 涂布于含Amp 的篩選平板上,正面向上放置半小時,待菌液完全被培養(yǎng)基吸收后倒置培養(yǎng)皿,37℃培養(yǎng)16-24 小時 各個步驟的目的是什么？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2016-01-06 10:40:13
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