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萬法唯心新蟲 (小有名氣)
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實時熒光定量RT-PCR實驗流程 已有4人參與
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2016-01-09 11:53:41, 47.5 K
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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一 樣本總類及樣本處理要求： 1 新鮮組織：切割標本后放于液氮或者-80℃冰箱保存，也可以直接將適量待測樣本置于trizol中在置于液氮或者-80℃冰箱保存。 2石蠟標本：常溫保存； 3全血標本：取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管，4度保存；或者全血分離單核細胞，液氮或者 -80℃冰箱保存 4體液標本：高速離心取沉淀； 5細胞標本：細胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。 二 操作步驟（了解） (一)組織總RNA的抽提 1 將所試驗的標本按序排放在管架 2 依次將各組組織100mg(米粒大小)轉(zhuǎn)移至5ml玻璃試管中,依次每一管中加入1ml Trizol(預(yù)冷) 電動勻漿器(轉(zhuǎn)速8000r/min)處理30~45秒.每標本間處理后用酒精(75%乙醇的配置:1倍的DEPC處理水加3倍的無水乙醇)棉球擦拭, DEPC處理水清洗. 3 依次將勻漿液轉(zhuǎn)至1.5mlEppendorf管中，加入預(yù)冷的氯仿200ul,振蕩搖勻15秒4℃,12000r/min, 離心15分鐘. 4小心吸出水層加入依次編號的Eppendorf管中,再加入二倍體積預(yù)冷的異丙醇(約600 ul),混勻,置于-20℃冰箱,30分鐘. |
20樓2016-03-02 17:07:57
2樓2016-01-09 12:02:55
0.8
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3樓2016-01-09 13:29:50
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4樓2016-01-09 15:06:17
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