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[求助]
T4DNA連接酶 已有1人參與
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| T4 DNA ligase的最佳反應(yīng)溫度是16℃,可以連過夜,那么酶的作用時(shí)間大約為多長呢？反應(yīng)體系放置幾天后最初起作用連接酶也會(huì)失活嗎？從而體系就沒被連接上嗎？請各位多多指教！！謝謝�。�！ |
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原海亮
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
里里外外: 金幣+5, ★★★很有幫助 2016-03-29 11:51:45
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
里里外外: 金幣+5, ★★★很有幫助 2016-03-29 11:51:45
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一般的酶制劑是會(huì)有一定活力上限的，通常負(fù)二十凍存可以保持活力，T4連接酶的使用，現(xiàn)在都有很多優(yōu)化條件，比如我們現(xiàn)在用的22°連接，一般兩小時(shí)，急得話半小時(shí)的也有用過，因?yàn)檫B接效率的問題關(guān)鍵在于片段和載體的處理上；另外關(guān)于時(shí)間后面的問題，T4 連接酶連接體系放久了，已連接的正常情況下是不會(huì)再被切開的，況且酶活力的體現(xiàn)和你連接體系的片段濃度也是有關(guān)的，就好像人就那么大力，你給他很少工作，他可以按時(shí)按量完成，超過他的能力后，可能那些多出來的工作他就沒法完成，但是能力范圍內(nèi)的還是可以的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-01-10 22:18:52
evil丶zero
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5樓2016-12-01 11:05:00
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