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8128sherry新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于分光光度法 已有1人參與
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導(dǎo)師今天找過去讓我做分光光度法測BCAA的濃度，因?yàn)閺膩頉]接觸過這個(gè)，導(dǎo)師給了片文章，讓我看著，照著做。 不過里面對(duì)于試劑的制作，我不太明白。 文章中有一句話： leucine dehydrogenase (45.2 units/mg) is diluted to 400 units/ml in 25mM sodium phosphate buffer, PH 7.2. 這個(gè)是說我要把 leucine dehydrogenase （濃度為 5.2 units/mg）通過加入25mM的磷酸鈉稀釋到濃度為400 units/ml。 這個(gè)磷酸鈉濃度是25mmol/L， 應(yīng)該是這樣，我不確定這個(gè)是否需要自己做，還是有現(xiàn)成的，不過磷酸鈉這個(gè)我只知道濃度要求，多少克的磷酸鈉加多少M(fèi)L水，這些都不知道啊，應(yīng)該怎么稀釋呢？ 另外 稀釋到400 units/ml 這個(gè)應(yīng)該怎么做，具體是怎么樣計(jì)算的， leucine dehydrogenase的單位是 units/mg，磷酸鈉溶液的話是mmol/L，兩個(gè)單位之間都不一樣的話，這個(gè)濃度怎么轉(zhuǎn)換。希望有大神給講解一下，因?yàn)橹笆菍W(xué)營養(yǎng)科學(xué)的，從來沒接觸過化學(xué)試劑制作，突然一來 有點(diǎn)慌張。。謝謝各位了。。。 |
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8128sherry: 金幣+3, ★★★★★最佳答案 2016-01-13 06:23:09
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2016-01-12 10:39:42
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You can buy the commercial reagent directly. (Links: http://www.cnreagent.com/s/v.php ... 4665e2f7058416ba04) Or you can prepare 1M stock solution (pH7.2) following the protocol below. For example, for preparation of 500mL 25mM sodium phosphate buffer, you need 12.5mL (500mL*25mM/1000mM) 1M sodium phosphate stock solution, then add ddH2O up to 500mL. When leucine dehydrogenase (45.2 units/mg) is diluted to 400 units/ml in 25mM sodium phosphate buffer, you need to weight 8.85g leucine dehydrogenase dissolved into 1 mL 25mM sodium phosphate buffer (400 units/ml / 45.2 units/mg=8.85g/mL). |
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2016-01-12 12:06:46, 75.59 K
3樓2016-01-12 12:06:46
8128sherry
新蟲 (初入文壇)
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4樓2016-01-13 00:29:21
8128sherry
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5樓2016-01-13 06:44:50
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