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wlt728鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[交流]
酶切問(wèn)題求助
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手里有一個(gè)工程菌，好幾年前構(gòu)建的，期間也提過(guò)質(zhì)粒又轉(zhuǎn)到表達(dá)菌里（傳代次數(shù)不清楚了）。最開(kāi)始做時(shí)，酶切后都只有目的基因一個(gè)小片段，現(xiàn)在酶切后，700bp下面都會(huì)多出一條帶，請(qǐng)問(wèn)一下是什么原因？酶切的條件也沒(méi)有改變。請(qǐng)問(wèn)大家這個(gè)該怎么辦。是什么原因造成的？難道要重新構(gòu)建合成么，才可以再酶切出只有目的基因一個(gè)小片段么？ 質(zhì)粒是pet-3C。雙酶是ndeI 和Bham I，marker左邊是2000，右邊是10000的。500bp下面的是目的蛋白，現(xiàn)在是700bp下面也有片段被切出來(lái)。 1.jpg |
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2樓2016-01-12 11:33:35
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3樓2016-01-12 11:34:17
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4樓2016-01-12 11:45:34
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7樓2016-01-12 11:53:01
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8樓2016-01-12 11:53:58
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10樓2016-01-12 11:57:59
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