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易農(nóng)植保新蟲 (初入文壇)
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[求助]
蛋白電泳求助 已有1人參與
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| 各位大神，最近直接用蛋白loading buffer煮真菌菌絲或者用液氮將菌絲研磨后加入loading buffer煮，離心后取10μl上樣跑SDS-PAGE，泳道會(huì)越跑越寬，而且很彌散，把旁邊正常的純蛋白泳道擠變形了都，這種情況該怎么解決？先多謝啦 |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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這個(gè)問題很少見哦，泳帶變寬說明蛋白單一，最好就是各一個(gè)孔點(diǎn)一個(gè)樣，如果這個(gè)方案不可取的話，那就用loading補(bǔ)傍邊的泳道，或者多一些，就是用loading平衡他們，應(yīng)該就好了。 祝福祝福  |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
易農(nóng)植保2樓2016-01-13 09:27:46
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3樓2016-01-13 09:48:08
| High salt concentration in these samples. Precipitate and resuspend or Dialyze these samples. |
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2016-01-13 10:56:46, 154.61 K
4樓2016-01-13 10:56:48
易農(nóng)植保
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5樓2016-01-13 11:05:49
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6樓2016-01-13 15:31:10
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Some samples run as "wide lanes", because of high salt concentration in these samples. Add trichloroacetic acid (TCA) to 10% (W/V) and incubate for 5 minutes at 4 degrees Celsius. Centrifuge and wash pellet with cold acetone. Resuspend pellet with SDS sample loading buffer in volume desired. If it dosen't work well, you should decrease voltage by 25-50%. |
7樓2016-01-13 16:16:43
8樓2016-01-18 18:56:37
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