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紫萸香慢001新蟲 (小有名氣)
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[交流]
求教求教:Taq酶作用???有沒有人告訴我
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Taq酶有沒有逆轉(zhuǎn)錄酶的作用,比如我拿mRNA加入Taq酶,最終能合成cDNA嗎。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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我就是用的提RNA的試劑盒,為驗證沒有DNA污染,我就拿提取的mRNA,用普通DNA的試劑盒擴(kuò)增相應(yīng)目的片段,結(jié)果還有陽性結(jié)果,這說明有DNA污染,但是我已經(jīng)很注意了,不知道怎么去除DNA污染,然后我看有的文獻(xiàn)說Taq酶有逆轉(zhuǎn)錄酶的作用,就懷疑,是否我的RNA沒有DNA污染,只不過Taq酶也有逆轉(zhuǎn)錄酶作用罷了。我不清楚到底為什么,求指教。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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新蟲 (小有名氣)
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嗯嗯,我也是買了專門的試劑盒,我之所以問Taq酶有沒有逆轉(zhuǎn)錄酶作用原因是這樣的,為驗證無DNA污染,我將提好的mRNA用taq酶擴(kuò)增相應(yīng)目的片段,普通PCR跑膠結(jié)果是陽性的,每次都這樣,我找不到原因,就猜想會不會taq酶也會對RNA起作用。另外,請問你做的是原核生物還是真核生物,提取的時候加了多少量,怎么驗證沒有DNA污染的。謝謝你啦 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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嗯嗯,謝謝你的熱心解答,我看的文獻(xiàn)只是提到Taq酶有反轉(zhuǎn)錄酶活性并未提及反應(yīng)條件,請用你做的時候DNA酶是怎么使用的,我買了天根的和普洛麥格的試劑盒都不行啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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