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[求助]
土壤narG、napA基因怎么都擴(kuò)增不出來，請(qǐng)大神們幫幫忙，謝謝謝謝
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| 想問一下有人做過narG這個(gè)功能基因嗎，我最近用1960f（5-TAY GTS GGC CAR GAR AA-3）/2659r（5-TTY TCR TAC CAB GTB GC）PCR擴(kuò)增（650bp），25ul體系引物各1.25ul（10umol/L），Taq酶0.1/0.25都試了，模板2ul（pcr 16S很亮），程序是95℃ 5min，94℃ 30s，59℃ 30s，72℃ 45s；前8個(gè)循環(huán)每個(gè)循環(huán)降0.5℃，后30個(gè)循環(huán)55℃；最后72℃ 6min，做了梯度PCR（47-60℃），可還是什么都沒p出來；還試了一下pcr的mix，只有很亮的引物二聚體，麻煩各位大神幫我找找原因，或者有誰做過這個(gè)功能基因告訴我一下您的條件，謝謝謝謝；我還想做napA，有人知道的話也可以告訴我一下經(jīng)驗(yàn)。。。 |
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2樓2020-05-14 13:46:21
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