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單抗制備后期鑒定問題，求助大神幫忙！ 已有1人參與
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從去年8月份到現(xiàn)在，克隆，純化蛋白，免疫小鼠，細(xì)胞融合，亞克隆，工作量巨大，但也都挺過來了，想要做一株可以鑒定某病毒1型和4型的單抗，現(xiàn)在一共凍存40株細(xì)胞，正在做后期檢測，收取雜交瘤上清之后，跟免疫小鼠的抗原、1型病毒、4型病毒分別進(jìn)行ELISA檢測，結(jié)果做出的這些單抗并不能區(qū)分1型和4型，退而求其次，不能區(qū)分的話，都可以反應(yīng)也可以用作其他檢測，再做亞型鑒定的時(shí)候我崩潰了，大多數(shù)的雜交瘤上清都同時(shí)有IgG和IgM,只有三株，跟免疫抗原反應(yīng)值不高跟病毒反應(yīng)值也很低的雜交瘤是IgG，沒有IgM，請教各位大神，這是什么情況？難道這些都不是單克隆嗎？細(xì)胞已經(jīng)凍存，接下來該怎么做？難道復(fù)蘇再克隆嗎？附上結(jié)果，請大神們幫忙！快過年了，急死我了。。。TOT。。。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 0.065 0.050 0.045 0.158 0.283 0.319 0.270 0.269 0.349 1.215 1.092 0.047 450 B 1.140 0.940 1.025 0.362 0.664 0.775 0.635 0.691 0.842 1.117 0.974 0.042 450 C 0.353 0.218 0.219 0.380 0.650 0.720 0.596 0.588 0.815 1.352 0.639 0.043 450 D 0.552 0.447 0.466 0.304 0.514 0.556 0.545 0.537 0.573 1.199 0.926 0.058 450 E 0.449 0.059 0.106 1.198 1.164 1.068 1.120 1.071 1.041 1.259 1.048 0.042 450 F 0.058 0.047 0.045 0.321 0.631 0.675 0.644 0.674 0.852 1.004 0.915 0.043 450 G 0.651 1.014 0.996 1.221 1.096 1.100 1.170 1.000 1.071 1.195 0.922 0.042 450 H 0.347 0.345 0.310 0.230 0.378 0.411 0.372 0.350 0.438 0.507 1.038 0.045 450  A-H分別是IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgM、IgA、Igκ、Igλ。 1-10是檢測的雜交瘤上清，11是陽性對照，12是sp2/0上清。 |
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swlsangon
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biocherry
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5樓2016-01-28 20:12:30
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