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253193152新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于植物蛋白激酶活性鑒定的疑問(wèn) 已有1人參與
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大家好,我的課題現(xiàn)在在研究一種水稻的蛋白激酶。在蛋白激酶的激酶活性驗(yàn)證上有些疑問(wèn)。 有的文獻(xiàn)是將激酶的激酶結(jié)構(gòu)域或者全長(zhǎng)進(jìn)行原核表達(dá),再與底物及放射性標(biāo)記的ATP進(jìn)行反應(yīng),最后進(jìn)行放射性檢測(cè)來(lái)驗(yàn)證底物是否被磷酸化。有的文獻(xiàn)是將蛋白激酶用其抗體從體內(nèi)免疫純化出來(lái),用純化的蛋白進(jìn)行激酶活性的驗(yàn)證。不知道到底該用原核表達(dá)的激酶還是該用體內(nèi)純化的激酶進(jìn)行Kinase assay,二者有啥區(qū)別及優(yōu)劣嗎? 生化小白求助,謝謝大家 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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