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eloi2017新蟲(chóng) (初入文壇)
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點(diǎn)突變半年了還沒(méi)出來(lái)。。求助。。 已有4人參與
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要突變啟動(dòng)子上一個(gè)位點(diǎn),試了酶切連接,NEB的HiFi Assembly,定點(diǎn)突變,用過(guò)TOP10F'和NEB 10ß做轉(zhuǎn)化,每次不是不長(zhǎng)就是WT。。 比如這次,倆片斷PCR完了跑膠看沒(méi)問(wèn)題,倆片斷和質(zhì)粒酶切完膠回收也都o(jì)k,然后連接完長(zhǎng)出來(lái)還是WT。。想不明白這WT是哪兒來(lái)的,按說(shuō)體系里應(yīng)該沒(méi)有了啊。。 求各位大神指點(diǎn)迷津。。 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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