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點(diǎn)突變半年了還沒出來。。求助。。 已有4人參與
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要突變啟動子上一個(gè)位點(diǎn),試了酶切連接,NEB的HiFi Assembly,定點(diǎn)突變,用過TOP10F'和NEB 10ß做轉(zhuǎn)化,每次不是不長就是WT。。 比如這次,倆片斷PCR完了跑膠看沒問題,倆片斷和質(zhì)粒酶切完膠回收也都o(jì)k,然后連接完長出來還是WT。。想不明白這WT是哪兒來的,按說體系里應(yīng)該沒有了啊。。 求各位大神指點(diǎn)迷津。。 |

銅蟲 (小有名氣)
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特異性不知道 降低循環(huán)數(shù)少于10 調(diào)整退火溫度 dpn1 處理2小時(shí) 過夜連接 突變我都不知道做了幾百個(gè) 關(guān)鍵摸準(zhǔn)退火溫度 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
銅蟲 (小有名氣)

銅蟲 (小有名氣)
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