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jinnini125木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于原核表達(dá)誘導(dǎo)條件 已有3人參與
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本人用的是全式金的原核表達(dá)載體,根據(jù)說(shuō)明書(shū)37度誘導(dǎo),設(shè)置時(shí)間梯度3.4.5三個(gè)梯度,IPTG濃度設(shè)置0.6 0.8 1.0三個(gè)梯度。未誘導(dǎo)的作為對(duì)照跑SDS-PAGE膠,結(jié)果如圖。目的條帶大約26KD,MARKER指示帶倒數(shù)第一是20KD左右,第二是29KD左右。 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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裂解不就是破碎細(xì)胞,用超聲波細(xì)胞破碎儀。然后看看破碎后菌液有沒(méi)有澄清,基本上澄清了就很少是包涵體,然后離心。取沉淀和上清,上清去純化就好了。再跑膠看看有沒(méi)有 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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應(yīng)該是表達(dá)了,你收集菌體,裂解一下,分別跑一個(gè)裂解液上清和沉淀看是包涵體還是可溶性表達(dá),一般情況下不用摸時(shí)間和IPTG濃度和溫度梯度,37℃,4到6小時(shí),iptg1mm就可以,做多了只是增加工作量,如果是包涵體表達(dá),就需要考慮前面的因素了,你跑的這個(gè)膠沒(méi)有太大意義,連未誘導(dǎo)的對(duì)照也沒(méi)有,所以沒(méi)法給你建議,做實(shí)驗(yàn)一定要設(shè)置陰性對(duì)照 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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.6lL 2026-03-18 | 5/250 |
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[考研] 材料工程專碩調(diào)劑 +5 | 204818@lcx 2026-03-17 | 6/300 |
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[考研] 267一志愿南京工業(yè)大學(xué)0817化工求調(diào)劑 +8 | SUICHILD 2026-03-12 | 8/400 |
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[考研] 一志愿武理材料305分求調(diào)劑 +5 | 想上岸的鯉魚(yú) 2026-03-18 | 6/300 |
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[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 一志愿京區(qū)211 2026-03-18 | 5/250 |
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[考研] 0854可跨調(diào)劑,一作一項(xiàng)核心論文五項(xiàng)專利,省、國(guó)級(jí)證書(shū)40+數(shù)一英一287 +8 | 小李0854 2026-03-16 | 8/400 |
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[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +10 | z1z2z3879 2026-03-16 | 13/650 |
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[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 總分331 +3 | ZY-05 2026-03-13 | 3/150 |
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[考研] 材料,紡織,生物(0856、0710),化學(xué)招生啦 +3 | Eember. 2026-03-17 | 9/450 |
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[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +8 | 大可digkids 2026-03-16 | 8/400 |
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[考研] 290求調(diào)劑 +3 | p asserby. 2026-03-15 | 4/200 |
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[考研] 機(jī)械專碩325,尋找調(diào)劑院校 +3 | y9999 2026-03-15 | 5/250 |
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[考研] 中科院材料273求調(diào)劑 +4 | yzydy 2026-03-15 | 4/200 |
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[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +3 | 呼呼?~+123456 2026-03-14 | 3/150 |
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[考研] 328求調(diào)劑 +3 | 5201314Lsy! 2026-03-13 | 6/300 |
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[考研] 材料工程調(diào)劑 +9 | 咪咪空空 2026-03-12 | 9/450 |
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[考研] 281求調(diào)劑 +9 | Koxui 2026-03-12 | 11/550 |
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[考研] 工科278分求調(diào)劑 +5 | 周慢熱啊 2026-03-12 | 7/350 |
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[考研] 求調(diào)劑 +3 | 程雨杭 2026-03-12 | 3/150 |
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[考研] 289求調(diào)劑 +3 | 李政瑩 2026-03-12 | 3/150 |
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