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lingkai11111新蟲 (小有名氣)
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[求助]
重組大腸桿菌培養(yǎng)的問題 已有5人參與
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| 各位前輩好,小弟不才,愚鈍異常,培養(yǎng)大腸桿菌中出現(xiàn)問題,譬如發(fā)酵六瓶(LB轉(zhuǎn)接至TB培養(yǎng)基),有一瓶長(zhǎng)的比較正常,另外幾瓶要么長(zhǎng)不起來一直澄清,要不先渾濁后來澄清(發(fā)酵液中有絲狀懸浮物),另外有一次培養(yǎng)過夜后菌體都長(zhǎng)起來了?傮w說,這六瓶較以前正常情況時(shí)更粘稠,泡沫也增多,氣味更難聞。懷疑是噬菌體感染,但是實(shí)驗(yàn)室其他同學(xué)做大腸桿菌培養(yǎng)都很正常,另外我用這些發(fā)酵液劃線沒有雜菌,也沒出現(xiàn)噬菌斑;之前懷疑菌種老化,但是活化菌種多次,每次都出現(xiàn)相同情況;也想過是培養(yǎng)基優(yōu)化后C:N變化導(dǎo)致,但是用以前的培養(yǎng)基培養(yǎng)照樣出現(xiàn)相同情況!不知道是什么原因,請(qǐng)各位高手不吝指教,小弟感謝不盡。。。 |
鐵蟲 (初入文壇)
鐵桿木蟲 (著名寫手)
新蟲 (小有名氣)
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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如果是相同菌種接種的,同時(shí)出現(xiàn)了正常和異常的發(fā)酵瓶,說明菌種應(yīng)該是沒問題,問題只能是培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件。菌種有問題不會(huì)出現(xiàn)正常發(fā)酵瓶。 接種量在延遲期差異表現(xiàn)比較明顯,接種量少的前期一直長(zhǎng)不起來。一般按8%左右接種都是沒問題的。 種子培養(yǎng)基一般是LB,這個(gè)培養(yǎng)基上都長(zhǎng)不出來?看看你的菌是否帶抗性,再看下你加的抗生素對(duì)不對(duì),大腸桿菌在LB上很好長(zhǎng)出來啊;蛘呔袉栴}了,換菌種。 |
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