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lingkai11111新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
重組大腸桿菌培養(yǎng)的問(wèn)題 已有5人參與
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| 各位前輩好，小弟不才，愚鈍異常，培養(yǎng)大腸桿菌中出現(xiàn)問(wèn)題，譬如發(fā)酵六瓶（LB轉(zhuǎn)接至TB培養(yǎng)基），有一瓶長(zhǎng)的比較正常，另外幾瓶要么長(zhǎng)不起來(lái)一直澄清，要不先渾濁后來(lái)澄清(發(fā)酵液中有絲狀懸浮物），另外有一次培養(yǎng)過(guò)夜后菌體都長(zhǎng)起來(lái)了。總體說(shuō)，這六瓶較以前正常情況時(shí)更粘稠，泡沫也增多，氣味更難聞。懷疑是噬菌體感染，但是實(shí)驗(yàn)室其他同學(xué)做大腸桿菌培養(yǎng)都很正常，另外我用這些發(fā)酵液劃線沒(méi)有雜菌，也沒(méi)出現(xiàn)噬菌斑；之前懷疑菌種老化，但是活化菌種多次，每次都出現(xiàn)相同情況；也想過(guò)是培養(yǎng)基優(yōu)化后C:N變化導(dǎo)致，但是用以前的培養(yǎng)基培養(yǎng)照樣出現(xiàn)相同情況！不知道是什么原因，請(qǐng)各位高手不吝指教，小弟感謝不盡。。。 |
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laozuzunzhe
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zhang8826857: 金幣+3, 你懂的O(∩_∩)O 2014-05-19 10:45:35
zhang8826857: 金幣+3, 你懂的O(∩_∩)O 2014-05-19 10:45:35
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如果是相同菌種接種的，同時(shí)出現(xiàn)了正常和異常的發(fā)酵瓶，說(shuō)明菌種應(yīng)該是沒(méi)問(wèn)題，問(wèn)題只能是培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件。菌種有問(wèn)題不會(huì)出現(xiàn)正常發(fā)酵瓶。 接種量在延遲期差異表現(xiàn)比較明顯，接種量少的前期一直長(zhǎng)不起來(lái)。一般按8%左右接種都是沒(méi)問(wèn)題的。 種子培養(yǎng)基一般是LB，這個(gè)培養(yǎng)基上都長(zhǎng)不出來(lái)？看看你的菌是否帶抗性，再看下你加的抗生素對(duì)不對(duì)，大腸桿菌在LB上很好長(zhǎng)出來(lái)啊�；蛘呔袉�(wèn)題了，換菌種。 |
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lingkai111114樓2014-05-19 09:00:42
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5樓2014-05-19 12:14:02
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 染噬菌體了！非常確定你這個(gè)的可能性 。 |
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7樓2014-05-19 16:44:35
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8樓2014-05-19 17:25:48
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 菌種是不是有污染？這很可能是菌種里帶雜菌。一般搖瓶實(shí)驗(yàn)染噬菌體不會(huì)是培養(yǎng)基或者環(huán)境問(wèn)題，上發(fā)酵罐才會(huì)有噬菌體的問(wèn)題吧 |
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9樓2014-05-21 10:20:44
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10樓2014-05-21 21:58:25
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