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lingkai11111新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
重組大腸桿菌培養(yǎng)的問(wèn)題 已有5人參與
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| 各位前輩好,小弟不才,愚鈍異常,培養(yǎng)大腸桿菌中出現(xiàn)問(wèn)題,譬如發(fā)酵六瓶(LB轉(zhuǎn)接至TB培養(yǎng)基),有一瓶長(zhǎng)的比較正常,另外幾瓶要么長(zhǎng)不起來(lái)一直澄清,要不先渾濁后來(lái)澄清(發(fā)酵液中有絲狀懸浮物),另外有一次培養(yǎng)過(guò)夜后菌體都長(zhǎng)起來(lái)了。總體說(shuō),這六瓶較以前正常情況時(shí)更粘稠,泡沫也增多,氣味更難聞。懷疑是噬菌體感染,但是實(shí)驗(yàn)室其他同學(xué)做大腸桿菌培養(yǎng)都很正常,另外我用這些發(fā)酵液劃線(xiàn)沒(méi)有雜菌,也沒(méi)出現(xiàn)噬菌斑;之前懷疑菌種老化,但是活化菌種多次,每次都出現(xiàn)相同情況;也想過(guò)是培養(yǎng)基優(yōu)化后C:N變化導(dǎo)致,但是用以前的培養(yǎng)基培養(yǎng)照樣出現(xiàn)相同情況!不知道是什么原因,請(qǐng)各位高手不吝指教,小弟感謝不盡。。。 |
生活常識(shí)圖書(shū)與技能 |
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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如果是相同菌種接種的,同時(shí)出現(xiàn)了正常和異常的發(fā)酵瓶,說(shuō)明菌種應(yīng)該是沒(méi)問(wèn)題,問(wèn)題只能是培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件。菌種有問(wèn)題不會(huì)出現(xiàn)正常發(fā)酵瓶。 接種量在延遲期差異表現(xiàn)比較明顯,接種量少的前期一直長(zhǎng)不起來(lái)。一般按8%左右接種都是沒(méi)問(wèn)題的。 種子培養(yǎng)基一般是LB,這個(gè)培養(yǎng)基上都長(zhǎng)不出來(lái)?看看你的菌是否帶抗性,再看下你加的抗生素對(duì)不對(duì),大腸桿菌在LB上很好長(zhǎng)出來(lái)啊;蛘呔袉(wèn)題了,換菌種。 |
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
新蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (小有名氣)
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (小有名氣)
| 染噬菌體了!非常確定你這個(gè)的可能性 。 |
新蟲(chóng) (小有名氣)
| 菌種是不是有污染?這很可能是菌種里帶雜菌。一般搖瓶實(shí)驗(yàn)染噬菌體不會(huì)是培養(yǎng)基或者環(huán)境問(wèn)題,上發(fā)酵罐才會(huì)有噬菌體的問(wèn)題吧 |

新蟲(chóng) (小有名氣)
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