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lingkai11111新蟲 (小有名氣)
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[求助]
重組大腸桿菌培養(yǎng)的問題 已有5人參與
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| 各位前輩好，小弟不才，愚鈍異常，培養(yǎng)大腸桿菌中出現(xiàn)問題，譬如發(fā)酵六瓶（LB轉(zhuǎn)接至TB培養(yǎng)基），有一瓶長的比較正常，另外幾瓶要么長不起來一直澄清，要不先渾濁后來澄清(發(fā)酵液中有絲狀懸浮物），另外有一次培養(yǎng)過夜后菌體都長起來了�？傮w說，這六瓶較以前正常情況時(shí)更粘稠，泡沫也增多，氣味更難聞。懷疑是噬菌體感染，但是實(shí)驗(yàn)室其他同學(xué)做大腸桿菌培養(yǎng)都很正常，另外我用這些發(fā)酵液劃線沒有雜菌，也沒出現(xiàn)噬菌斑；之前懷疑菌種老化，但是活化菌種多次，每次都出現(xiàn)相同情況；也想過是培養(yǎng)基優(yōu)化后C:N變化導(dǎo)致，但是用以前的培養(yǎng)基培養(yǎng)照樣出現(xiàn)相同情況！不知道是什么原因，請各位高手不吝指教，小弟感謝不盡。。。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 菌種是不是有污染？這很可能是菌種里帶雜菌。一般搖瓶實(shí)驗(yàn)染噬菌體不會(huì)是培養(yǎng)基或者環(huán)境問題，上發(fā)酵罐才會(huì)有噬菌體的問題吧 |
lingkai11111
9樓2014-05-21 10:20:44
laozuzunzhe
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2樓2014-05-18 21:02:32
lingkai11111
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3樓2014-05-19 08:30:07
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhang8826857: 金幣+3, 你懂的O(∩_∩)O 2014-05-19 10:45:35
zhang8826857: 金幣+3, 你懂的O(∩_∩)O 2014-05-19 10:45:35
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如果是相同菌種接種的，同時(shí)出現(xiàn)了正常和異常的發(fā)酵瓶，說明菌種應(yīng)該是沒問題，問題只能是培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件。菌種有問題不會(huì)出現(xiàn)正常發(fā)酵瓶。 接種量在延遲期差異表現(xiàn)比較明顯，接種量少的前期一直長不起來。一般按8%左右接種都是沒問題的。 種子培養(yǎng)基一般是LB，這個(gè)培養(yǎng)基上都長不出來？看看你的菌是否帶抗性，再看下你加的抗生素對不對，大腸桿菌在LB上很好長出來啊。或者菌有問題了，換菌種。 |
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4樓2014-05-19 09:00:42
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