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老貓飛上天新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
重組質(zhì)粒做出來(lái)雜帶多 已有1人參與
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我的目標(biāo)條帶在2000bp左右。第一張圖是菌液pcr，體系20ul,酶10 上下引物各1 菌液1ul，p出來(lái)很多雜帶，目標(biāo)條帶有但是很弱。通過(guò)篩選，將可疑的選出來(lái)提質(zhì)粒。第二張圖是把菌液中的質(zhì)粒提出來(lái)之后pcr，體系20ul 酶10 上下引物各1 質(zhì)粒0.2，但是p出來(lái)效果跟菌液pcr效果一樣。引物應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題，我現(xiàn)在準(zhǔn)備將質(zhì)粒酶切再跑一次看看，請(qǐng)問(wèn)我的問(wèn)題出在哪里，求大神指點(diǎn) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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zhouxfd
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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- 專(zhuān)業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
2樓2017-07-18 00:57:51
老貓飛上天
新蟲(chóng) (初入文壇)
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謝謝指教。但是我的模板和質(zhì)粒都是相同內(nèi)切酶切的，引物，酶，體系和程序都跟前面p模板的一樣。如果是引物特異性不好，該怎么驗(yàn)證呢 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
3樓2017-07-20 09:32:14
zhouxfd
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4樓2017-07-21 00:21:16
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