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老貓飛上天新蟲 (初入文壇)
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[求助]
重組質(zhì)粒做出來雜帶多 已有1人參與
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我的目標(biāo)條帶在2000bp左右。第一張圖是菌液pcr,體系20ul,酶10 上下引物各1 菌液1ul,p出來很多雜帶,目標(biāo)條帶有但是很弱。通過篩選,將可疑的選出來提質(zhì)粒。第二張圖是把菌液中的質(zhì)粒提出來之后pcr,體系20ul 酶10 上下引物各1 質(zhì)粒0.2,但是p出來效果跟菌液pcr效果一樣。引物應(yīng)該沒有問題,我現(xiàn)在準(zhǔn)備將質(zhì)粒酶切再跑一次看看,請問我的問題出在哪里,求大神指點 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
新蟲 (初入文壇)
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謝謝指教。但是我的模板和質(zhì)粒都是相同內(nèi)切酶切的,引物,酶,體系和程序都跟前面p模板的一樣。如果是引物特異性不好,該怎么驗證呢 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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