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sod,pod測定是遇到的問題 已有2人參與
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在測定sod的過程中,由于第一批用試劑盒測定的數(shù)據(jù)不好,只能重新測了,其中2個梯度的材料總共只剩下0.2g葉片材料保存于-80,其他3批材料還有還有0.6g,所以只能按比例減少用量來測定,一共還要測定sod,pod,cat,可溶性糖,Pro,葉綠素含量,mda,任務多,材料少,現(xiàn)在正在探索用0.05g材料去實驗,有沒有大神懂用的材料少可不可以測定出結果來。 現(xiàn)在的主要問題是我的磷酸緩沖液是0.05mol,ph=7.8的,研磨完液體就會變成紅棕色,這樣的酶液還能不能用是不是已經(jīng)失活了還能不能測定?而且很快就會變色,會不會是因為室溫太高了造成的?現(xiàn)在由于材料有限,只能講上清液稀釋才夠用,稀釋之后影響測定結果嗎,還是直接用0.05g材料加入5ml緩沖液測定呢?還有就是在4000lx的光下反應8分鐘時A0=0 8,按照實驗說明就應該停止反應了,可是其他測定管還沒有變色,看不出有沒有大道50%的抑制率,不明白50%抑制率是一個什么標準。求大神指點,問題有點多 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
木蟲 (正式寫手)
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看樓主的資料應該也是農(nóng)學同行,我們之前做小麥的時候 7.0和7.8的都用過, 差別不大。不過后來逐步自己改良了一下,用7.8緩沖液,加適量EDTA或EDTA二鈉鹽,完后加適量PVP。僅供參考吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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最近在做實驗 然后用紫外法測植物CAT過氧化氫酶 植物葉子上學期摘的 然后零下八十攝氏度保存了 這個學期來測的 我們用的是0.15g葉子 研磨 定容10ml 然后離心 取上清液0.1ml 然后加0.1ml 2%的H2O2和2ml磷酸緩沖液 但是測的過程那個變化值都不是降的 就一直升 是因為酶失活 還是因為用的樣品量太小 還是因為H2O2的用量有問題啊 有大神知道嗎 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
銅蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
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研磨完的顏色要看你具體的材料是啥。另外根據(jù)樓主的描述,建議提取液中添加適量PVP防止組織中的酚氧化產(chǎn)生別的顏色干擾結果。另外,材料一般可以成比例減少用量,但最好保證材料質量和提取液的比例不變,后面公式計算活性時再乘減少的倍數(shù)即可。祝好! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
木蟲 (正式寫手)
新蟲 (小有名氣)
新蟲 (初入文壇)

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