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甜筒D新蟲 (初入文壇)
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[求助]
sod，pod測(cè)定是遇到的問題 已有2人參與
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在測(cè)定sod的過程中，由于第一批用試劑盒測(cè)定的數(shù)據(jù)不好，只能重新測(cè)了，其中2個(gè)梯度的材料總共只剩下0.2g葉片材料保存于-80，其他3批材料還有還有0.6g，所以只能按比例減少用量來測(cè)定，一共還要測(cè)定sod，pod，cat，可溶性糖，Pro，葉綠素含量，mda，任務(wù)多，材料少，現(xiàn)在正在探索用0.05g材料去實(shí)驗(yàn)，有沒有大神懂用的材料少可不可以測(cè)定出結(jié)果來。 現(xiàn)在的主要問題是我的磷酸緩沖液是0.05mol，ph=7.8的，研磨完液體就會(huì)變成紅棕色，這樣的酶液還能不能用是不是已經(jīng)失活了還能不能測(cè)定？而且很快就會(huì)變色，會(huì)不會(huì)是因?yàn)槭覝靥吡嗽斐傻�？現(xiàn)在由于材料有限，只能講上清液稀釋才夠用，稀釋之后影響測(cè)定結(jié)果嗎，還是直接用0.05g材料加入5ml緩沖液測(cè)定呢？還有就是在4000lx的光下反應(yīng)8分鐘時(shí)A0=0 8,按照實(shí)驗(yàn)說明就應(yīng)該停止反應(yīng)了，可是其他測(cè)定管還沒有變色，看不出有沒有大道50%的抑制率，不明白50%抑制率是一個(gè)什么標(biāo)準(zhǔn)。求大神指點(diǎn)，問題有點(diǎn)多 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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甜筒D(晉鵬代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流~歡迎常來農(nóng)林版交流經(jīng)驗(yàn)~ 2017-09-30 19:28:03
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看樓主的資料應(yīng)該也是農(nóng)學(xué)同行，我們之前做小麥的時(shí)候 7.0和7.8的都用過， 差別不大。不過后來逐步自己改良了一下，用7.8緩沖液，加適量EDTA或EDTA二鈉鹽，完后加適量PVP。僅供參考吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2017-09-28 22:02:25
晉鵬: 鼓勵(lì)回帖交流~ 2018-03-23 20:29:56
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最近在做實(shí)驗(yàn) 然后用紫外法測(cè)植物CAT過氧化氫酶 植物葉子上學(xué)期摘的 然后零下八十?dāng)z氏度保存了 這個(gè)學(xué)期來測(cè)的 我們用的是0.15g葉子 研磨 定容10ml 然后離心 取上清液0.1ml 然后加0.1ml 2%的H2O2和2ml磷酸緩沖液 但是測(cè)的過程那個(gè)變化值都不是降的 就一直升 是因?yàn)槊甘Щ?還是因?yàn)橛玫臉悠妨刻?還是因?yàn)镠2O2的用量有問題啊 有大神知道嗎 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
8樓2018-03-23 20:03:08
qiushi0312
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7樓2017-09-30 09:49:15
氚核
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【答案】應(yīng)助回帖
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研磨完的顏色要看你具體的材料是啥。另外根據(jù)樓主的描述，建議提取液中添加適量PVP防止組織中的酚氧化產(chǎn)生別的顏色干擾結(jié)果。另外，材料一般可以成比例減少用量，但最好保證材料質(zhì)量和提取液的比例不變，后面公式計(jì)算活性時(shí)再乘減少的倍數(shù)即可。祝好！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2017-09-28 20:31:29
甜筒D
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2樓說的有道理，我去試一試，按比例磨樣 提上清液，再稀釋去測(cè)，測(cè)完計(jì)算時(shí)再乘回來？是這個(gè)意思吧？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-09-28 21:15:35
甜筒D
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4樓2017-09-28 21:25:23
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考慮到你樣品少并且測(cè)的指標(biāo)多，可以考慮少取材料，比如說文獻(xiàn)是0.5g，實(shí)際可以用0.1g。提取液體積不變的話，不就相當(dāng)于稀釋5倍嘛 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-09-28 21:58:53
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10樓2019-01-28 19:03:15
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